無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒其通用保存原則如下
更新時(shí)間:2025-06-27 點(diǎn)擊次數(shù):24
無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒是一種用于在離體條件下合成蛋白質(zhì)的工具,在科研和工業(yè)領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。該試劑盒的核心原理是利用無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng),在體外模擬細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)合成過程。它通常包含細(xì)胞提取物、能量源、氨基酸、輔因子等必要組分,以及核酸模板(如質(zhì)粒DNA、線性DNA或mRNA)。通過加入目標(biāo)蛋白質(zhì)的編碼模板,試劑盒可以在短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)高效的蛋白質(zhì)合成。
無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒具有諸多優(yōu)勢(shì)。首先,它操作簡(jiǎn)便,只需加入模板、提取物和底物即可開始表達(dá),像做PCR一樣簡(jiǎn)單。其次,表達(dá)快速,通常只需2-4小時(shí)即可完成實(shí)驗(yàn)。再者,它具有高普適性,能突破傳統(tǒng)細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的極限,實(shí)現(xiàn)大分子蛋白、毒蛋白、膜蛋白及不溶蛋白的表達(dá),表達(dá)量可達(dá)3mg/ml反應(yīng)體系。此外,試劑盒的自由度高,可根據(jù)需求添加蛋白酶抑制劑、稀有密碼子、金屬離子等添加劑,或進(jìn)行tRNA修飾和氨基酸標(biāo)記等,還能進(jìn)行多個(gè)模板的同時(shí)表達(dá),表達(dá)出的多個(gè)蛋白自動(dòng)組裝。
1、低溫保存
大多數(shù)無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒需要低溫保存,通常為-20℃或-80℃。
具體溫度要求需參考試劑盒說明書,避免因溫度過高導(dǎo)致蛋白或酶失活。
2、避免反復(fù)凍融
反復(fù)凍融會(huì)破壞試劑中的蛋白質(zhì)、酶或核酸成分,導(dǎo)致活性下降。
建議將試劑分裝成小份,僅取出一次實(shí)驗(yàn)所需的量,剩余部分繼續(xù)保存。
3、干燥環(huán)境
保持試劑干燥,避免受潮或接觸水分,防止微生物污染或成分降解。
4、避光保存
某些試劑(如熒光標(biāo)記物或光敏成分)對(duì)光敏感,需用錫箔紙包裹或存放在暗處。